血液培養とは、血液を培養ボトルに入れ、35℃〜37℃で振盪培養し、菌を検出する検査です。
以下に血液培養の注意点などを解説します。
採取のタイミング
原則として、敗血症を疑う状況で採取します。
菌を検出するためには、抗菌薬を投与する前に採取することが重要です。
採取部位
上肢の静脈からの採取が推奨されています。
下肢からの採血や、カテーテルを経由した採血は、コンタミネーションの危険が増します。
ただし、カテーテル関連血流感染症を疑う場合は、カテーテルからの採取が重要です。
なお、動脈血から採血するメリットは確認されていません。
消毒
消毒には、「アルコール＋ポピドンヨード」、「ヨードチンキ」あるいは「クロルヘキシジンアルコール（０．５％以上）」が適しています。
なお、アルコールのみでは、バシラス属やクロストリジウム属が消毒しきれません。
採血量
好気ボトルと嫌気ボトルの２本を組み合わせて「１セット」とします。
１セットあたりの採血量は２０～３０ｍｌとし、各ボトルに１０〜１５ｍｌ注入します。
ボトルに注入する血液量には、下限と上限があります。
下限を下回ると、検出感度が下がります。
上限を上回ると、偽陽性や偽陰性の発生頻度が高まります。
なお、もし末梢循環不全などで十分量の血液を採取できない場合、血液を好気ボトルのみに注入して培養検査を行います。
これは起因菌の多くが好気ボトルで培養可能だからです。
セット数
望ましくは、２４時間以内に２セットないし３セットの採取を実施します。
同時に２セットないし３セットの採取をしても構いません。
典型的には、左右の上肢から採取し、２セットとします。
複数セット採取のメリットとしては、検出感度の向上や、コンタミネーションの判断に有用であること等が挙げられます。
なお、感染性心内膜炎の診断には、時間をずらして３セット採取することが有効です。
培養時間
培養時間は、５日間で充分とされます。
ただし、つぎの菌種は、５日間では発育困難な場合があるので、起炎菌として疑う場合は、５日の時点で陰性でも、延長培養することが薦められます。
・Helicobacter cinaedi
・Francisella spp
・Brucella spp
・Bartonella spp
・Aggregatibacter spp
・Cardiobacterium spp
・Mycobacterium spp
・Nocardia spp
・Campylobacter spp
・Candida glabrata
・Cryptococcus neoformans等。
また、次の菌はボトルでの発育が困難とされます。
Leptospira sppおよびLegionella spp
陽性判定後
機器により陽性判定されたボトルは、転倒混和し、スライドに滴下して染色します。
そして、染色結果をもとに、血液寒天培地を基本に、チョコレート寒天培地、グラム陰性菌用培地、嫌気性菌用培地など、使う培地を選び、また、培養方法を決定します。
その他
血液が固まらないようにするため、ボトルには、抗凝固剤のＳＰＳが含有されています。
抗凝固剤のＳＰＳは、ほかの抗凝固剤に比べ、菌に対する発育を抑制する効果が低いため、血液培養ボトルに含有させるのに適しています。
ただし、ＳＰＳは、ナイセリア属や一部の嫌気性菌については、発育を抑制してしまうというデメリットがあります。